牛疱疹病毒1型（BHV-1）是一种对全球养牛业危害极大的高传染性病毒，可引发牛的呼吸道和生殖系统多种疾病，导致巨大的经济损失。因此，牛疱疹病毒1型的快速、准确检测对于该病的预防和控制尤为重要。近日，宁夏大学生命科学学院王玉炯、李勇、郭慧琛团队在中国科学院1区top期刊《International Journal of Biological Macromolecules》（2025 IF: 7.7）发表了题为“Double antibodysandwich ELISA based on rabbit monoclonal antibody targeting gD protein for thedetection of bovine herpesvirus 1”的研究论文，成功构建了一种基于兔单抗的双抗体夹心ELISA检测方法，为牛疱疹病毒1型的精准检测提供了新的工具。

该研究以牛疱疹病毒1型的gD蛋白为靶点，构建了一个容量为7.14×10¹⁰cfu/mL的兔源单链片段变量（scFv）噬菌体展示库。通过三轮生物淘选，获得了三种高亲和力的scFv，并利用CHO-K1细胞表达出三种高亲和力的兔单克隆抗体。基于D3为捕获抗体、D2为检测抗体，成功建立了双抗体夹心ELISA方法。实验结果显示，在3% BSA封闭、抗原孵育90分钟、显色15分钟的条件下，该方法对牛疱疹病毒1型具有良好的特异性和稳定性，与其它牛相关病毒无交叉反应。同时，该方法的批内和批间变异系数均低于5%，具有良好的稳定性和可靠性。

该研究首次将兔单抗应用于牛疱疹病毒1型的检测方法开发，相较于传统的鼠源单抗和兔单抗具有更高的特异性和亲和力，能够有效提高检测的灵敏度和准确性。这一成果不仅为牛疱疹病毒1型的流行病学监测和预防提供了重要的技术支持，也为病毒相关诊断试剂的研发提供了新的思路和方法。该方法的建立为宁夏奶牛和肉牛产业的疾病防控和健康养殖提供了重要的技术支撑。

该研究得到了国家自然科学基金项目和宁夏回族自治区重点研发计划项目的资助。宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室博士研究生刘强是本研究论文的第一作者，宁夏大学王玉炯教授、李勇教授，郭慧琛教授为共同通讯作者。

原文链接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39929469/