宁夏大学王玉炯、李勇、郭慧琛团队成功建立基于兔单抗的双抗体夹心ELISA检测方法,助力牛疱疹病毒1型防控
牛疱疹病毒1型(BHV-1)是一种对全球养牛业危害极大的高传染性病毒,可引发牛的呼吸道和生殖系统多种疾病,导致巨大的经济损失。因此,牛疱疹病毒1型的快速、准确检测对于该病的预防和控制尤为重要。近日,宁夏大学生命科学学院王玉炯、李勇、郭慧琛团队在中国科学院1区top期刊《International Journal of Biological Macromolecules》(2025 IF: 7.7)发表了题为“Double antibodysandwich ELISA based on rabbit monoclonal antibody targeting gD protein for thedetection of bovine herpesvirus 1”的研究论文,成功构建了一种基于兔单抗的双抗体夹心ELISA检测方法,为牛疱疹病毒1型的精准检测提供了新的工具。该研究以牛疱疹病毒1型的gD蛋白为靶点,构建了一个容量为7.14×10¹⁰cfu/mL的兔源单链片段变量(scFv)噬菌体展示库。通过三轮生物淘选,获得了三种高亲和力的scFv,并利用CHO-K1细胞表达出三种高亲和力的兔单克隆抗体。基于D3为捕获抗体、D2为检测抗体,成功建立了双抗体夹心ELISA方法。实验结果显示,在3% BSA封闭、抗原孵育90分钟、显色15分钟的条件下,该方法对牛疱疹病毒1型具有良好的特异性和稳定性,与其它牛相关病毒无交叉反应。同时,该方法的批内和批间变异系数均低于5%,具有良好的稳定性和可靠性。该研究首次将兔单抗应用于牛疱疹病毒1型的检测方法开发,相较于传统的鼠源单抗和兔单抗具有更高的特异性和亲和力,能够有效提高检测的灵敏度和准确性。这一成果不...